[VIP第1年] 指数:3
蛋白质的处理：胶体金标记蛋白的制备：胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。待标记蛋白溶液的制备将待标记蛋白预先对0.005Mol/LpH7.0NaCl溶液中4℃透析过夜，以除去多余的盐离子，然后100000g4℃离心1h，去除聚合物。待标胶体金溶液的准备以0.1Mol/LK2CO3或0.1Mol/LHCl调胶体金液的pH值。标记IgG时，调至9.0；标记McAb时，调至8.2；标记亲和层析抗体时，安徽手持式胶体金读数仪代理商，调至7.6；标记SPA时，调至5.9～6.2；标记ConA时，调至8.0；标记亲和素时，调至9～10.由于胶体金溶液可能损坏pH计的电板，因此，在调节pH时，采用精密pH试纸测定为宜。由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附，并可使溶胶聚沉，故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意，蛋白质溶液应确保澄清无细小微粒，否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在，因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附，安徽手持式胶体金读数仪代理商。 互联网功能丰富，安徽手持式胶体金读数仪代理商，支持远程质控，远程标曲升级等云端通讯。安徽手持式胶体金读数仪代理商
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点：*方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定性好，不需冷藏。*相比而言，其生产成本和检测成本均较低。*检测标本种类多：可用于查血、尿液或粪便，因而适合各种检查湖北胶体金检测读数仪参考价格胶体金技术很适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等, 具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。
金标半定量：1、DIGFA：可用标准色阶对比法及质控标准对照法。标准色阶对比法是以与被测物浓度相对应的深浅不同的色带板与被测反应板显色斑点对比估计被测物浓度；质控标准对照法是以质控品同时测定对比色泽半定量。2、DIGCA：可用质控线对比法及多条测定线法。质控线对比法质控线色泽为临床临界浓度显色。多条测定线法在NC膜上置多条受体线(抗体或抗原)，显色线条数与被测物浓度相关，或显色线第几条与被测物浓度达到多少浓度相关。
胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存：胶体金具有很高的动力学稳定性，在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢，可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂，但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚，但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性，如蛋白质、葡萄糖、PEG20000 等的加入有良好的稳定效果。当金溶胶吸附蛋白质后，溶胶的稳定性随溶液pH 而变化，而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点，如ConA ，过氧化物酶等，当pH 较低时保持稳定，提高pH 则显得不稳定，接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2 ～0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4 ～10℃ 贮存数月有效，不宜冰冻。
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免疫胶体金的应用1、胶体金在光镜水平、电镜水平的应用直径为3～15nm胶体金均可用作电镜水平的标记物。优点是可以通过应用不同大小的颗粒进行双重或多重标记。胶体金用于光镜水平、电镜水平的研究，主要包括：①细胞悬液或单层培养中细胞表面抗原的观察。②单层培养中细胞内抗原的检测。③组织切片中抗原的检测。2、胶体金在流式细胞仪中的应用应用胶体金标记的抗体，分析细胞表面抗原。胶体金可以明显地改变红激光散射角，区分不同的标记，能同时进行几种标记。3、凝集试验单分散的免疫金溶胶清澈透明。与相应抗原或抗体发生专一性反应后出现凝聚，溶胶颗粒增大、沉降，光散射随之发生变化，溶液的颜色发生变化。4、免疫印迹技术用聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质分离，得到的区带转移至硝酸纤维素膜，与特异性的抗体保温后，再与胶体金标记物温育，根据膜上胶体金颗粒颜色深浅可测知样品中的特异性抗原。金免疫印迹技术有相当高的灵敏度。采用免疫金银染色法，灵敏度可低至0.1ng。5、胶体金在肉眼水平的应用--胶体金免疫结合试验自动准确识别CT线位置。四川金标读数仪代理商
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胶体金的制备1、胶体金制备的注意事项（1）玻璃容器的清洁：玻璃容器应保持清洁，用前酸洗、硅化。（2）试剂、水质：实验用水一般用双蒸水。缓冲液有足够大的缓冲容量，浓度不应过高以免金溶胶自凝。2、常用方法一般采用还原法，常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、白磷。（1）柠檬酸三钠还原法：取0.01％氯金酸水溶液100ml加热至沸，搅动下准确加入１％柠檬酸三钠水溶液0.7ml，金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色，继续煮沸15分钟，冷却后以蒸馏水恢复到原体积，如此制备的金溶胶其可见光区*高吸收峰在535nm，Ａ1cm/535nm=1.12。2）柠檬酸三钠－鞣酸混合还原剂：改变鞣酸的加入量，制得不同大小的胶体颗粒。（3）白磷还原法：制备的胶体金直径约6nm，并有很好的均匀度，但白磷和yimi均易燃易爆，一般实验室不宜采用。安徽手持式胶体金读数仪代理商
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